1. Класификација
Гел електрофореза је подељена на вертикалне типове (укључујући колонске гелове и гелове на плочама) и хоризонталне типове (углавном плочасте гелове) (Слика 6-18). Генерално, вертикално раздвајање је мало боље од хоризонталног, али хоризонтална припрема гела има најмање четири предности: постоји подршка испод целог гела, што омогућава употребу агарозе ниске концентрације; могуће је припремити плоче од агарозног гела различитих спецификација; припрема гела и пуњење узорка су погоднији; комора за електрофорезу је једноставна за конструисање и исплатива. Пошто се хоризонтална електрофореза изводи са плочом агарозног гела потпуно потопљеном око 1 мм испод површине пуфера за електрофорезу, она се назива и потопљена електрофореза.
Резервоар за електрофорезу ДИЦП-31ДН за електрофорезу у агарозном гелу
2.Буффер Систем
Код одвајања нуклеинских киселина, већина система усваја континуиране системе. Обично коришћени пуфери за електрофорезу укључују ТБЕ (0,08мол/Л Трис·ХЦл, пХ 8,5, 0,08мол/Л борне киселине, 0,0024мол/Л ЕДТА) пуфер и ТХЕ (0,04мол/Л Трис·ХЦл, пХ 7,8, 0,02мол/Л натријум ацетат, 0,0018 мол/Л ЕДТА) пуфера. Ови пуфери се углавном припремају као 10к основни раствори и разблажују се до потребне концентрације када се користе. Стопе миграције линеарне и кружне ДНК у агарозном гелу варирају у зависности од коришћеног пуфера. У пуферу ТХЕ, брзина миграције линеарне ДНК је већа од оне кружне ДНК, док је у ТБЕ пуферу супротно.
3. Припрема агарозног гела
(1) Припрема хоризонталног агарозног гела
(а) Припремите потребну концентрацију агарозног гела користећи 1к пуфер за електрофорезу.
(б) Загрејати агарозу до потпуног растварања или у кључалу воденом купатилу, на магнетној мешалици или у микроталасној пећници. Охладити раствор агарозе на 55°Ц и додати етидијум бромид (ЕБ) боју до коначне концентрације од 0,5 μг/мл.
(ц) Запечатите ивице стаклених или акрилних плоча са малом количином агарозног гела, додајте чешаљ и поставите зупце чешља око 0,5~1,0 мм изнад плоче.
(д) Континуирано сипајте растопљени раствор гела агарозе у калуп за стакло или акрилну плочу (дебљина зависи од запремине узорка ДНК), избегавајући уношење ваздушних мехурића. Нека се природно стврдне на собној температури.
(е) Пажљиво уклоните чешаљ након потпуног очвршћавања. Додајте одговарајућу количину пуфера за електрофорезу у резервоар за гел, обезбеђујући да је гел плоча потопљена око 1 мм испод површине пуфера за електрофорезу.
(2) Припрема вертикалног агарозног гела
(а) Уклоните масноћу или остатке са стаклених плоча испирањем етанолом.
(б) Поставите одстојне плоче између предње и задње бране, поравнајте ивице одстојних плоча са предњом и задњом браном и причврстите их стезаљкама.
(ц) Додајте 2% агарозе у 1к пуфер између ивица одстојних плоча да бисте формирали 1 цм висок агарозни чеп на дну коморе за ливење гела.
(д) Сипајте отопљени гел агарозе у жељеној концентрацији, припремљен у 1к пуферу, у комору за гел до 1 цм испод врха.
(е) Уметните чешаљ, избегавајући да мехурићи ваздуха заробе испод зубаца чешља. Понекад се током хлађења агарозног гела могу појавити боре на зубима чешља; у таквим случајевима једноставно додајте мало истопљене агарозе на врх да се учврсти.
(ф) Уклоните чешаљ. Да бисте спречили цурење пуфера у отвор за пуњење, затворите везу између плоче са агарозним гелом и коморе за електрофорезу са 2% агарозе и додајте потребну количину пуфера.
(г) Додајте 1к пуфер за електрофорезу у комору за гел.
(х) Пажљиво убаците узорке ДНК на агарозни гел испод пуфера.
Више информација о основним знањима о електрофорези у агарозном гелу поделићемо следеће недеље. Желимо да ове информације буду од помоћи вашем експерименту.
Пекинг Лиуии Биотецхнологи Цо. Лтд (Лиуии Биотецхнологи) је специјализован за производњу инструмената за електрофорезу више од 50 година са сопственим професионалним техничким тимом и центром за истраживање и развој. Имамо поуздану и комплетну производну линију од дизајна до инспекције, складиште, као и маркетиншку подршку. Наши главни производи су ћелија за електрофорезу (резервоар/комора), напајање за електрофорезу, плави ЛЕД трансилуминатор, УВ трансилуминатор, систем за анализу гела и слике итд.
Сада тражимо партнере, и ОЕМ резервоар за електрофорезу и дистрибутери су добродошли.
Ако имате било какав план куповине за наше производе, не устручавајте се да нас контактирате. Можете нам послати поруку на е-маил[е-маил заштићен]или[е-маил заштићен], или нас позовите на +86 15810650221 или додајте Вхатсапп +86 15810650221 или Вецхат: 15810650221.
Скенирајте КР код да бисте га додали на Вхатсапп или ВеЦхат.
Време поста: 07.12.2023