Гел електрофореза је једна од главних метода које се користе у молекуларној биологији за анализу ДНК. Ова метода укључује миграцију фрагмената ДНК кроз гел, где се раздвајају на основу величине или облика. Међутим, да ли сте икада наишли на грешке током експеримената са електрофорезом, као што су размазане траке на агарозном гелу или без трака на гелу? Шта би могао бити узрок ових грешака?
Наши техничари су овде сажели неколико начина за решавање проблема за вашу референцу.
1. Намазане траке на агарозном гелу
●ДНК је деградиран. Избегавајте контаминацију нуклеазама.
● Пуфер за електрофорезу није свеж. После вишеструке употребе пуфера за електрофорезу, јонска снага се смањује, а пХ вредност му се повећава, па капацитет пуфера слаби, што утиче на ефекат електрофорезе. Препоручује се честа замена пуфера за електрофорезу.
● Коришћени су неодговарајући услови електрофорезе. Не дозволите да напон пређе 20 В/цм и одржавајте температуру <30° Ц током електрофорезе. За електрофорезу огромног ДНК ланца, температура треба да буде <15° Ц. Проверите да ли пуфер за електрофорезу има довољан капацитет пуфера.
● Превише ДНК је набачено на гел. Смањите количину ДНК.
● Превише соли у ДНК. Користите преципитацију етанолом да бисте уклонили вишак соли унапред.
● ДНК је контаминирана протеином. Користите екстракције фенола за уклањање протеина у напредним фазама.
● ДНК је денатурисан. Не загревати пре електрофорезе. Разблажити ДНК у пуферу са 20 мМ НаЦл.
2. Аномалије Миграција ДНК трака
● Ренатурација ЦОС места фрагмента λХинд ИИИ. Загревајте ДНК 5 минута на 65°Ц пре електрофорезе, а затим је охладите на јединици леда 5 минута.
● Коришћени су неодговарајући услови електрофорезе. Не дозволите да напон пређе 20 В/цм и одржавајте температуру <30° Ц током електрофорезе. Проверите да ли пуфер за електрофорезу има довољан капацитет пуфера.
● ДНК је денатурисан. Не загревати пре електрофорезе. Разблажити ДНК у пуферу са 20 мМ НаЦл.
3. Бледе или никакве ДНК траке на агарозном гелу
● Није било довољне количине или концентрације ДНК напуњене на гел. Повећајте количину ДНК. Електрофореза у полиакриламидном гелу је нешто осетљивија од електрофорезе агарозе, а оптерећење узорком се може на одговарајући начин смањити.
● ДНК је деградиран. Избегавајте контаминацију нуклеазама.
● ДНК је подвргнут електрофорези са гела. Електрофорезујте гел за краће време, користите нижи напон или користите гел са већим процентом.
● За визуелизацију ДНК обојене етидијум бромидом коришћен је неодговарајући извор светлости В. Користите краткоталасну (254 нм) В светлост за већу осетљивост.
4. Недостају ДНК траке
●ДНК мале величине је електрофорезан са гела. Електрофорезујте гел за краће време, користите нижи напон или користите већи проценат гела.
● Тешко је разликовати ДНК траке сличних молекула. Повећајте време електрофорезе и проверите концентрацијугела како бисте били сигурни да ће постотак гела бити искоришћен.
● ДНК је денатурисан. Не загревати пре електрофорезе. Разблажити ДНК у пуферу са 20 мМ НаЦл.
● ДНК ланци су огромни, а конвенционална гел електрофореза није прикладна. Анализа на пулсној гел електрофорези.Које друге проблеме сте имали са електрофорезом у агарозном гелу? Истражићемо више за водиче у будућности.
Пекинг Лиуии биотецхнологи Цо., Лтд (Лиуии Биотецх) је специјализована компанија која се фокусира на производе повезане са електрофорезом у Кини. Његова прича почиње 1970. године када Кина још није ушла у реформу и време отварања. Кроз вишегодишњи развој, Лиуии Битотецх има сопствени бренд, који је познат као Лиуии Бранд на домаћем тржишту за производе за електрофорезу.
Бренд Лиуии има више од 50 година историје у Кини и компанија може да обезбеди стабилне и висококвалитетне производе широм света. Кроз године развоја, вредан је вашег избора!
Хоризонталне ћелије за електрофорезу (резервоари/комори) компаније Лиуии Биотецх су високог квалитета са добрим изгледом. Са различитим величинама посуда за гел, оне могу да задовоље ваше различите експерименталне захтеве. Имамо сопствени технички тим и фабрику. Од дизајна до производње, сировина до кључних делова, можемо контролисати цео процес. Серија ДИЦП 31 је за ДНК електрофорезу, која је моделДИЦП-31БН, ДИЦП-31ЦН,ДИЦП-31ДН, иДИЦП-31Е. Разлике међу њима су величина гела и цена. Нудимо пуне величине производа за наше купце. МоделДИЦП-32Цможе направити највећи гел 250мм * 250мм.
У међувремену, препоручујемо наше напајање за електрофорезуДИИ-6Ц,ДИИ-6ДиДИИ-10Цза наше ћелије за електрофорезу (резервоари/комори) серије ДИЦП-31 и 32.
Ако желите више информација о производима, посетите ову веб локацију да бисте добили више, и добродошли да нас контактирате путем е-поште како бисте нам рекли шта желите и видели да ли можемо да вам понудимо решења.
За више информација о нама, контактирајте нас путем е-поште[е-маил заштићен], [е-маил заштићен].
Време поста: 09.05.2022