Увод
Гел електрофореза је основна техника у молекуларној биологији, која се широко користи за одвајање протеина, нуклеинских киселина и других макромолекула. Правилна контрола запремине узорка, напона и времена електрофорезе је кључна за постизање тачних и поновљивих резултата.Наш лабораторијски колега нудинајбоље праксе за управљање овим параметрима током СДС-ПАГЕ гел електрофорезе.
Беијинг Лиуии Биотецхнологи производи за гел електрофорезу
Количина узорка: Обезбеђивање доследности
Приликом извођења СДС-ПАГЕ електрофорезе, запремина узорка је кључни фактор који може значајно утицати на резолуцију ваших резултата. Генерално се препоручује да се убаци 10 µЛ укупног протеина по бунарчићу. Да би се обезбедила конзистентност и спречила дифузија узорка између суседних бунара, важно је да у било које празне бунарчиће убаците једнаку запремину пуфера за пуњење 1к. Ова мера предострожности помаже да се спречи ширење узорака у суседне траке, до чега може доћи ако се бунар остави празан.
Пре него што убаците своје узорке, увек почните додавањем маркера молекулске тежине у један бунар. Ово омогућава лаку идентификацију величина протеина након електрофорезе.
Контрола напона: брзина и резолуција балансирања
Напон који се примењује током електрофорезе директно утиче и на брзину којом узорци мигрирају кроз гел и на резолуцију раздвајања. За СДС-ПАГЕ, препоручљиво је почети са ниским напоном од око 80В. Овај почетни низак напон омогућава узорцима да мигрирају споро и равномерно, концентришући их у оштру траку док улазе у гел за одвајање.
Када узорци потпуно уђу у гел за одвајање, напон се може повећати на 120В. Овај виши напон убрзава миграцију, осигуравајући да се протеини ефикасно раздвајају у складу са њиховом молекуларном тежином. Неопходно је пратити напредак фронта боје бромофенол плаве боје, што указује на завршетак електрофорезе. За гелове са концентрацијом од 10-12%, обично је довољно 80-90 минута; међутим, за 15% гелове, можда ћете морати мало да продужите време трајања.
Управљање временом: знати када престати
Време је још један критични фактор у гел електрофорези. Предуго или прекратко коришћење гела може довести до неоптималног раздвајања. Миграција бромофенол плаве боје је користан показатељ: када дође до дна гела, обично је време да се заустави трчање. За стандардне гелове, као што је 10-12%, обично је адекватно трајање електрофорезе од око 80-90 минута. За гелове са већим процентом, као што је 15%, време рада треба продужити како би се обезбедило потпуно одвајање протеина.
Управљање бафером: Поновно коришћење и припрема бафера
Пуфер за електрофорезу се може поново користити 1-2 пута, у зависности од специфичних услова ваше лабораторије. Међутим, за оптималне резултате, препоручује се да се припреми свеж 10к пуфер и разблажи га непосредно пре употребе. Ово осигурава да пуфер одржава своју ефикасност, што доводи до поузданијих резултата електрофорезе.
Беијинг Лиуии Биотецхнологи производи за гел електрофорезу
Пажљивом контролом запремине узорка, напона и времена електрофорезе, можете значајно побољшати тачност и поновљивост резултата ваше гел електрофорезе. Примена ових најбољих пракси у вашем лабораторијском раду ће вам помоћи да постигнете јасније и јасније опсеге, што ће довести до бољих података за анализу низводно.
Ако имате више добрих метода за оптимизацију експеримента гел електрофорезе, добродошли да разговарате са нама!
Пекинг Лиуии Биотецхнологи Цо. Лтд (Лиуии Биотецхнологи) је специјализован за производњу инструмената за електрофорезу више од 50 година са сопственим професионалним техничким тимом и центром за истраживање и развој. Имамо поуздану и комплетну производну линију од дизајна до инспекције, складиште, као и маркетиншку подршку. Наши главни производи су ћелија за електрофорезу (резервоар/комора), напајање за електрофорезу, плави ЛЕД трансилуминатор, УВ трансилуминатор, систем за гел имиџ и анализу итд. Такође испоручујемо лабораторијске инструменте као што су ПЦР инструмент, вортекс миксер и центрифуга за лабораторију.
Ако имате било какав план куповине за наше производе, не устручавајте се да нас контактирате. Можете нам послати поруку на е-маил[е-маил заштићен]или[е-маил заштићен], или нас позовите на +86 15810650221 или додајте Вхатсапп +86 15810650221 или Вецхат: 15810650221.
Скенирајте КР код да бисте га додали на Вхатсапп или ВеЦхат.
Време поста: 20.08.2024